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2 x Universal SYBR qPCR Mix 熒光定量

  • 型   號:71711
  • 價   格:
  • 更新時間:2025-04-23
  • 廠家性質:經銷商

2× Universal SYBR qPCR Mix是SYBR Green I 嵌合染料法專用的qPCR試劑,為2x 預混液,包含除引物和DNA樣品以外的所有qPCR組分,可減少操作步驟,縮短加樣時間,降低污染幾率。
2 x Universal SYBR qPCR Mix 熒光定量

2 x Universal SYBR qPCR Mix

 

 2 x Universal SYBR qPCR Mix 熒光定量

目錄號:71711

產品內容

Components

71711-500

500 rxns (20 μl/rxn)

71711-2500

2500 rxns (20 μl/rxn)

2x Universal SYBR qPCR Mix

1 ml x5

1 ml x25

保存條件

-20℃保存,有效期 24 個月。使用前,充分融解,輕輕顛倒混勻,短期使用可放在 4 ℃,避免反復凍融。

產品簡介

2× Universal SYBR qPCR Mix是SYBR Green I 嵌合染料法專用的qPCR試劑,為2x 預混液,包含除引物和DNA樣品以外的所有qPCR組分,可減少操作步驟,縮短加樣時間,降低污染幾率。其核心組分是全新的Hotmaster Taq DNA聚合酶,配合精心優化的Buffer體系,有效抑制非特異性擴增,可對寬廣濃度范圍的模板進行準確定量,獲得穩定可靠的qPCR結果,具有靈敏度高、特異性強、穩定性好等特點。

預混液中含有通用型ROX,適用于所有qPCR儀,使用qPCR Mix時不需要額外添加ROX來校正儀器。

操作步驟:

1. 將DNA模板、引物、2 x Universal SYBR qPCR Mix、RNase-Free H2O溶解并置于冰上備用。

2. 冰上配制qPCR反應體系:(以20μl反應體系為例)

Components

Volume (20μl)

Final Concentration

2 x Universal SYBR qPCR Mix

10 μl

DNA Template

Variable

As required

Forward Primer (10μM)

0.4 μl

0.2 μM each

Reverse Primer (10μM)

0.4 μl

0.2 μM each

RNase-free H2O

Up to 20 μl

Not applicable

注意:

1) 推薦模板加樣量為1-2μl / 20μl反應體系,cDNA原液≤總反應體系的10%,基因組DNA的量為10-100 ng。因不同種類的DNA模板中含有的靶基因拷貝數不同,可對模板進行梯度稀釋,以確定最佳的模板使用量。

2) 通常推薦引物濃度為0.2 μM,就可以得到較好的結果,反應效果不佳時可在0.1 - 1.0 μM范圍內進行調整。擴增效率不高的情況下,可提高引物濃度;發生非特異性反應時,可降低引物濃度,由此優化反應體系。

3. qPCR反應程序

 

注意:1) 本產品兼容性強,絕大多數情況下使用二步法和三步法均可獲得良好效果。一般來說,二步法擴增特異性高,三步法擴增效率高。如果融鏈曲線較差,可以嘗試兩步法擴增或提高退火溫度;如果因使用Tm值較低的引物等原因,得不到良好的實驗結果時,可嘗試加長延伸時間或者進行三步法PCR擴增。
2) 根據引物的Tm值進行退火&延伸(退火)溫度的設定;
3) 延伸(退火&延伸)時間的設置還需要根據您所使用的qPCR儀所需要的最短數據采集時間自行調整。
4) 融解曲線分析請以所使用的熒光定量PCR儀推薦的程序進行設定。
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 2 x Universal SYBR qPCR Mix 熒光定量

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